分居期间是可以主张对方支付抚养费的，根据最高人民法院关于适用《中华人民共和国婚姻法》若干问题的解释(三) 第三条规定，即使父母双方分居期间，也支持未成年子女要求另一方支付抚养费的诉讼请求。抚养未成年子女是父母的法定义务，法律并没有规定离婚是主张子女抚养费的前置条件。所以，可以肯定的是夫妻双方虽然未离婚，但在分居期间同样需要支付未成年子女的抚养费的。
二、《中华人民共和国民法典》(2021年1月1日起施行)
第一千零六十七条??父母不履行抚养义务的，未成年子女或者不能独立生活的成年子女，有要求父母给付抚养费的权利。
第一千零七十一条??非婚生子女享有与婚生子女同等的权利，任何组织或者个人不得加以危害和歧视。
不直接抚养非婚生子女的生父或者生母，应当负担未成年子女或者不能独立生活的成年子女的抚养费。
第一千零八十五条??离婚后，子女由一方直接抚养的，另一方应当负担部分或者全部抚养费。负担费用的多少和期限的长短，由双方协议;协议不成的，由人民法院判决。
第一千一百一十八条??收养关系解除后，经养父母抚养的成年养子女，对缺乏劳动能力又缺乏生活来源的养父母，应当给付生活费。因养子女成年后虐待、遗弃养父母而解除收养关系的，养父母可以要求养子女补偿收养期间支出的抚养费。
生父母要求解除收养关系的，养父母可以要求生父母适当补偿收养期间支出的抚养费;但是，因养父母虐待、遗弃养子女而解除收养关系的除外。
以上就是我国法律上明确规定的支付抚养费的具体条件，涉及到相关事项的认定，应当由双方首先进行协商处理，如果就抚养费的支付标准可以达成一致意见的，那么是可以根据双方约定的标准来支付抚养费的，无法达成一致意见的可以起诉到法院处理。
